(50 تفاعلًا) مجموعة استخلاص الحمض النووي لبكتيريا السل

توضیحات محصول:

مجموعة استخلاص الحمض النووي من البراز KPG-DNKSTT هي منتج متخصص وفعال من شركة كارمانيا بارس جين، مصممة لتنقية الحمض النووي عالي النقاء من عينات البراز. باستخدام تقنية أعمدة السيليكا ومحاليل ما قبل التحلل المخصصة، توفر هذه المجموعة طريقة سريعة وسهلة وموثوقة لاستخلاص الحمض النووي الجينومي من مصادر متنوعة لعينات البراز، مما يجعلها مثالية لمجموعة واسعة من التطبيقات في الكشف عن مسببات الأمراض المعوية، ودراسة الميكروبيوم المعوي، وتفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR)، وتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (Real-Time PCR)، والتسلسل الجيني، والدراسات الجينية والوبائية.

المزايا والتطبيقات الرئيسية لمجموعة KPG-DNKSTT:

– مصممة خصيصًا لعينات البراز: باستخدام محلول ما قبل التحلل المخصص، تستطيع هذه المجموعة إزالة مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل الموجودة في البراز (مثل الأحماض الصفراوية، والسكريات المتعددة، والهيم) بفعالية، واستخلاص الحمض النووي بنقاء عالٍ.

المزايا والتطبيقات الرئيسية لمجموعة KPG-DNKSTT:

– مصممة خصيصًا لعينات البراز: باستخدام محلول ما قبل التحلل المخصص، تستطيع هذه المجموعة إزالة مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل الموجودة في البراز (مثل الأحماض الصفراوية، والسكريات المتعددة، والهيم) واستخلاص الحمض النووي بنقاء عالٍ. – التوافق مع عينات متنوعة: بالإضافة إلى البراز، يمكن لهذه المجموعة استخلاص الحمض النووي من اللعاب، والدم، والمصل، والبلازما، ووسط نقل الخلايا الخالي من الخلايا (VTM)، ومزارع الخلايا، والبكتيريا سالبة الغرام، ومستخلصات الأنسجة.

– تقنية عمود السيليكا: طريقة قياسية ذات قدرة عالية على امتصاص الحمض النووي، مما يوفر نقاءً وكفاءةً مثاليين.

– التخلص من مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR): صُممت عملية الاستخلاص لتقليل المثبطات الشائعة في عينات البراز، وتوفير حمض نووي مناسب للاختبارات الجزيئية.

– جودة ونقاء استثنائيان: الحمض النووي المستخلص خالٍ من البروتين والملوثات الأخرى، ويتميز بنسبة امتصاص مثالية عند 260 نانومتر/280 نانومتر.

– ثبات الحمض النووي المستخلص: يبقى الحمض النووي النقي ثابتًا لأكثر من ستة أشهر عند درجة حرارة -20 درجة مئوية.

– تصميم إيراني، جودة عالمية: منتج من شركة إيرانية رائدة في مجال المعرفة، وفقًا للمعايير الدولية.

محتويات المجموعة (الرمز: KPG-DNKSTT):

– محلول ما قبل التحلل B، 20 مل
– محلول التحلل A، 20 مل
– محلول التحلل B، 10 مل
– محلول الترسيب، 10 مل
– محلول الغسيل، 20 مل
– ماء مقطر خالٍ من إنزيم DNase، 5 مل
– عمود استخلاص الحمض النووي (KPG-Column)، 50 قطعة
– أنبوب تجميع، 100 قطعة
العينات المناسبة بالحجم المناسب:
– البراز: 0.2 غرام (متجانس)
– اللعاب: من 150 إلى 550 ميكرولتر
– الدم/البلازما/وسط نقل الفيروسات: 200 ميكرولتر
– مزرعة الخلايا: 10⁷ × 1 خلية
– الأنسجة: من 30 إلى 50 ملغ في 400 ميكرولتر من المحلول. قم بإجراء عملية ما قبل التحلل (التجانس)، ثم أضف 200 ميكرولتر من العينة المتجانسة.
نظرة عامة على عملية الاستخلاص:
تتلخص عملية الاستخلاص باستخدام هذه المجموعة في الخطوات الرئيسية التالية:
الخطوة 1 – التحضير والتحليل الأولي:
انقل 0.2 غرام من البراز المتجانس إلى أنبوب دقيق سعة 2 مل، وأضف 1000 ميكرولتر من محلول التحليل الأولي B. رجّ الأنبوب بقوة لمدة 15 ثانية، ثم حضّنه عند 50 درجة مئوية لمدة 10 دقائق (رجّ الأنبوب مرتين أو ثلاث مرات لمدة 3 ثوانٍ خلال هذه المدة).

الخطوة 2 – الفصل الأولي:
ضع الأنبوب الدقيق في جهاز الطرد المركزي لمدة دقيقتين عند 10000 دورة في الدقيقة، ثم انقل السائل الطافي إلى أنبوب دقيق جديد (تجنب نقل السائل الطافي).

الخطوة 3 – تحليل الخلايا:
أضف 1000 ميكرولتر من محلول التحليل A إلى العينة، ورجّها لمدة 15 ثانية، ثم حضّنها لمدة 10 دقائق في درجة حرارة الغرفة (رجّها كل 5 دقائق).

الخطوة 4 – استكمال عملية التحلل:
أضف 200 ميكرولتر من محلول التحلل B واخلط جيدًا لمدة 5 ثوانٍ.

الخطوة 5 – الطرد المركزي والترسيب:
ضع الأنبوب الصغير في جهاز الطرد المركزي بسرعة 8000-10000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق، ثم انقل السائل الطافي إلى أنبوب صغير جديد خالٍ من إنزيمات DNase/RNase. بعد ذلك، أضف 300 ميكرولتر من محلول الترسيب البارد واخلط جيدًا.

الخطوة 6 – تمرير العينة إلى العمود والربط:
انقل 1000 ميكرولتر من الخليط إلى عمود استخلاص الحمض النووي، ثم ضعه في جهاز الطرد المركزي بسرعة 8000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة.

الخطوة 7 – الغسل:
انقل العمود إلى أنبوب تجميع جديد، وأضف 500 ميكرولتر من محلول الغسل، ثم ضعه في جهاز الطرد المركزي بسرعة 8000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة. الخطوة 8 – الاستخلاص والتجميع:
انقل العمود إلى أنبوب تجميع جديد، وأضف 50 ميكرولتر من الماء المقطر الخالي من إنزيمات DNase/RNase (يفضل أن يكون بدرجة حرارة 60 درجة مئوية)، ثم حضّنه لمدة دقيقتين في درجة حرارة الغرفة. بعد ذلك، قم بالطرد المركزي بسرعة 8000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة.

الخطوة 9 – التخزين:
يمكن تخزين الحمض النووي المستخلص عند درجة حرارة -20 درجة مئوية لمدة تصل إلى ستة أشهر.

يتوفر دليل كامل خطوة بخطوة للاستخلاص مع التفاصيل الفنية في دليل المنتج (المرفق مع المجموعة).

نقاط أساسية لتحسين الاستخلاص:

– التجانس الجيد: تجانس عينة البراز جيدًا للحصول على أفضل استخلاص.

– الخلط أثناء التحضين: رجّ العينة عدة مرات أثناء التحضين مع محلول ما قبل التحلل ومحلول التحلل A لتحسين أداء المجموعة.

– تجنب نقل المادة الفعالة سطحيًا: أثناء خطوة نقل السائل الطافي، تجنب نقل الدهون أو المخاط الذي قد يكون تراكم على السطح.
– درجة حرارة ماء الإذابة: استخدام الماء المقطر عند 60 درجة مئوية بدلاً من درجة حرارة الغرفة يزيد من كفاءة فصل الحمض النووي من العمود.

– مراقبة الجودة: استخدم جهاز Nanodrop عند 260 و280 نانومتر للتحقق من دقة وكمية الحمض النووي النقي.

معلومات السلامة:
– يتميز المحلولان A وB في المجموعة بدرجة حموضة عالية (قلوية وحمضية) وقد يُسببان تهيجًا للجهاز العصبي. لذا، احرص على ارتداء القفازات عند التعامل مع هذين المحلولين.

– في حالة ملامسة الجلد، اشطفه بكمية وفيرة من الماء.

– في حالة ملامسة العينين، اشطفهما بكمية وفيرة من الماء، واستشر الطبيب عند الضرورة.