(50 تفاعلًا) مجموعة استخلاص الحمض النووي الريبي/الحمض النووي الفيروسي باستخدام الخرز المغناطيسي

توضیحات محصول:

نقدم لكم مجموعة KPG-MVDRF لاستخلاص الحمض النووي الفيروسي (DNA/RNA) باستخدام المغناطيس

تُعدّ مجموعة KPG-MVDRF لاستخلاص الحمض النووي الفيروسي (DNA وRNA) باستخدام المغناطيس منتجًا متطورًا ومتخصصًا من شركة كارمانيا بارس جين، مصممة لتنقية الأحماض النووية (DNA وRNA) في آنٍ واحد من عينات بيولوجية متنوعة تحتوي على فيروسات. باستخدام تقنية الجسيمات النانوية المغناطيسية (الخرز المغناطيسي)، توفر هذه المجموعة طريقة سريعة وحساسة للغاية وقابلة للتطوير والتشغيل الآلي لاستخلاص المادة الوراثية بنقاء عالٍ جدًا، مما يجعلها مثالية لتطبيقات التشخيص الجزيئي الحساسة مثل تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي (RT-PCR) وتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (Real-Time PCR) والكشف عن فيروسات الجهاز التنفسي (مثل فيروس سارس-كوف-2 والإنفلونزا) وفيروس الورم الحليمي البشري (HPV) وغيرها من العدوى الفيروسية.

– الاستخلاص المتزامن للحمض النووي (DNA) والحمض النووي الريبي (RNA): القدرة على تنقية كلا النوعين من الأحماض النووية في آنٍ واحد من عينة واحدة، مما يجعلها فعالة للغاية في الكشف عن الفيروسات ذات الجينوم DNA والحمض النووي الريبي (RNA).

– تقنية الخرز المغناطيسي: تتميز هذه الطريقة الحديثة بمزايا فريدة مقارنةً بطرق الأعمدة والترسيب، بما في ذلك السرعة العالية (تستغرق العملية بأكملها أقل من 30 دقيقة)، والتشغيل الآلي (مناسبة لروبوتات الاستخلاص)، والحساسية الاستثنائية في العينات ذات الحمل الفيروسي المنخفض، والحدّ بشكل كبير من خطر التلوث المتبادل.

– التوافق مع عينات متنوعة: هذه المجموعة مُحسّنة للاستخلاص من عينات مختلفة مثل المصل، والبلازما، ووسط نقل الخلايا الخالي من الخلايا (VTM)، ومزارع الخلايا، وسوائل LBC (لاختبار فيروس الورم الحليمي البشري).

– جودة ونقاء استثنائيان: الأحماض النووية المستخلصة خالية من مثبطات تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) ولها نسبة امتصاص مثالية عند 260/280 نانومتر.

– توفير الوقت والتكلفة: عدد أقل من الخطوات، وجهد أقل مطلوب، ولا حاجة لأجهزة طرد مركزي عالية السرعة أثناء العملية (باستثناء الخطوة الأولى).

– تصميم إيراني، جودة عالمية: منتج من شركة إيرانية رائدة في مجال المعرفة، وفقًا للمعايير الدولية.

– تصميم إيراني، جودة عالمية: منتج من شركة إيرانية رائدة في مجال المعرفة، وفقًا للمعايير الدولية. محتويات المجموعة (الرمز: KPG-MVDRF):

– محلول التحلل B، 25 مل

– محلول التحلل C، 5 مل

– خرز مغناطيسي، 10 مل

– محلول الغسيل، 20 مل

– بروتينيز K، 1 مل (يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية)

– حامل، 500 ميكرولتر (يُحفظ في درجة حرارة -20 درجة مئوية)

– ماء مقطر خالٍ من إنزيمات DNase/RNase، 10 مل

– 50 أنبوبًا دقيقًا سعة 2 مل
– عينات قابلة للاستخدام بالحجم المناسب:

– الدم/البلازما/وسط نقل الفيروس: 200 ميكرولتر

– مزرعة الخلايا: 10⁷ × 1 خلية

– سائل LBC (لاختبار فيروس الورم الحليمي البشري): وفقًا للتعليمات.

نصيحة هامة لزيادة الكفاءة: لزيادة عدد النسخ، قم بتدوير العينة البيولوجية المحتوية على الفيروس في جهاز الطرد المركزي بسرعة 3000 دورة في الدقيقة لمدة دقيقة واحدة، واستخدم أكبر قدر ممكن من السائل الطافي. يحتوي على المزيد من الفيروس، لاستخلاص المادة الجينية.

نظرة عامة على عملية الاستخلاص:
تتلخص عملية الاستخلاص باستخدام هذه المجموعة في الخطوات الرئيسية التالية:
الخطوة 1 – تحلل الخلايا:

– أضف 500 ميكرولتر من محلول التحلل B إلى أنبوب دقيق سعة 2 مل مُرفق في المجموعة.

– أضف كمية مناسبة من العينة (مثل 200 ميكرولتر من المصل أو سائل LBC) و20 ميكرولتر من بروتينيز K مع 10 ميكرولتر من المحلول الحامل إلى الأنبوب الدقيق.

– اخلط جيدًا باستخدام جهاز الخلط الدوامي لمدة 15 ثانية.

– حضّن لمدة 10 دقائق عند 55 درجة مئوية. (اخلط العينات باستخدام جهاز الخلط الدوامي كل 5 دقائق).

الخطوة 2 – الارتباط بالجسيمات النانوية:

– أضف 100 ميكرولتر من محلول التحلل C إلى الأنبوب الدقيق واخلط جيدًا لمدة 5 ثوانٍ.

– أضف 200 ميكرولتر من الجسيمات النانوية المغناطيسية إلى الأنبوب الدقيق. (تأكد من رجّ الأنبوب جيدًا قبل إزالة الجسيمات النانوية لضمان توزيعها بالتساوي في المحلول).

– اخلط جيدًا باستخدام جهاز الخلط الدوامي، ثم حضّنه لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة.

الخطوة 3 – الفصل المغناطيسي وإزالة السائل الطافي:

– ضع الأنبوب الدقيق في حامل مغناطيسي، وحضّنه لمدة 30 ثانية. ستنتقل الجسيمات المغناطيسية المرتبطة بالحمض النووي DNA/RNA إلى المغناطيس الموجود في الحامل.

– باستخدام أداة سحب العينات، اسحب السائل من الأنبوب الدقيق الموجود في الحامل بطريقة لا تصطدم بالجسيمات المغناطيسية.

– ملاحظة: بتحريك الأنبوب الدقيق لأعلى ولأسفل في الحامل، افصل السائل المتبقي داخل الجسيمات النانوية بحيث يتجمع في نهاية الأنبوب، ثم افصله باستخدام أداة سحب العينات وتخلص منه.

الخطوة 3 – الفصل المغناطيسي وإزالة السائل الطافي:

ملاحظة: بتحريك الأنبوب الدقيق لأعلى ولأسفل في الحامل، افصل السائل المتبقي داخل الجسيمات النانوية بحيث يتجمع في نهاية الأنبوب، ثم افصله باستخدام أداة سحب العينات وتخلص منه. الخطوة 4 – الغسل:

– أخرج الأنابيب الدقيقة من الحامل المغناطيسي، وأضف 800 ميكرولتر من محلول الغسل إلى الأنابيب، واخلط جيدًا.

– أعد الأنبوب الدقيق إلى الحامل المغناطيسي، واستخدم أداة سحب العينات لتفريغ السائل دون ملامسته للجسيمات المغناطيسية.

الخطوة 5 – الاستخلاص وجمع الحمض النووي DNA/RNA:

– أضف 100 ميكرولتر من الماء المقطر الخالي من إنزيمات DNase/RNase، ورجّ جيدًا، ثم حضّن لمدة دقيقتين في درجة حرارة الغرفة.

– ملاحظة: يُفضّل أن تكون درجة حرارة الماء المقطر حوالي 55 درجة مئوية لفصل الحمض النووي DNA أو RNA بشكل أفضل.

– ضع الأنبوب الدقيق في حامل مغناطيسي، وحضّن لمدة 30 ثانية.

– يحتوي السائل الموجود في الأنبوب الدقيق على الحمض النووي DNA أو RNA النقي. باستخدام أداة سحب العينات، أزل السائل من الأنبوب الدقيق دون ملامسة الجسيمات المغناطيسية، وانقله إلى أنبوب دقيق معقم وخالٍ من إنزيمات DNase/RNase.

الخطوة 6 – التخزين:
استخدم عينة الحمض النووي (DNA/RNA) المستخلصة فورًا أو خزّنها في درجة حرارة -20 درجة مئوية لاستخدامها لاحقًا.

يتوفر دليل استخلاص كامل خطوة بخطوة مع تفاصيل فنية في دليل المنتج (المرفق مع المجموعة).

نقاط أساسية لتحسين عملية الاستخلاص:

– تجانس الجسيمات النانوية: قبل كل عملية استخلاص.